Nearly Complete Genome Sequence of a Serotype 1 Fowl Adenovirus Strain Isolated in Jiangsu, China
发布时间:2022-01-29点击次数:
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DOI码:10.16303/j.cnki.1005-4545.2021.07.02
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所属单位:扬州大学
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发表刊物:中国兽医学报
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关键字:猪德尔塔冠状病毒,核衣壳(N)蛋白,原核表达,间接ELISA
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摘要:通过DNAStar Protean软件对猪德尔塔冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus,PDCoV)N蛋白氨基酸序列进行分析,选取抗原性较强的区段(265~342 aa),根据大肠杆菌密码子使用的偏嗜性进行优化设计并人工合成了对应的基因片段N-Opti。利用融合表达载体pET-32a进行原核表达,获得的融合蛋白携带His标签,命名为PDCoV-N-His,且呈可溶性表达。Western Blot鉴定结果显示,该重组N蛋白约为31 kDa,与预期相符。利用Ni-NTA亲和层析介质纯化重组N蛋白作为包被抗原进行ELISA检测,并对反应条件进行摸索、优 化,建 立 了 检 测PDCoV特 异 性 抗 体的间接ELISA方法。经测定,该方法具有良好的特异性且重复性良好,与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PRoV)特异性阳性血清无交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%。应用该方法对20份已知阳性血清和20份阴性血清分别进行检测,结果显示阳性符合率为100%(20/20),阴性符合率为100%(20/20)。结果表明,该方法的特异性良好,可以进一步用于PDCoV感染的快速诊断和流行病学调查。
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合写作者:白雪雁,张成成,郭梦娇,李梦娇,廖凯,薛峰,吴艳涛
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第一作者:钱炳旭
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论文类型:研究报告
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通讯作者:张小荣
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论文编号:1005-4545(2021)07-1234-08
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学科门类:农学
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一级学科:兽医学
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文献类型:J
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卷号:41
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期号:7
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页面范围:1234-1241
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是否译文:否
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发表时间:2021-07-15
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张小荣
个人信息
- 正高级
博士生导师
硕士生导师 - 教师拼音名称:Zhang Xiaorong
- 出生日期:1978-09-30
- 电子邮箱:
- 入职时间:2003-07-01
- 所在单位:兽医学院
- 学历:博士研究生毕业
- 办公地点:文汇路校区农牧南楼S203
- 性别:男
- 联系方式:E.mail:zxr@yzu.edu.cn
- 学位:博士
- 职称:正高级
- 在职信息:在岗
- 毕业院校:扬州大学
- 学科:预防兽医学
曾获荣誉:
- 2021-12-31扬州大学“十三五”科技工作先进个人
- 2021-10-222020-2021学年“最受学生欢迎的班主任”
- 2017-06-302016年江苏省普通高等学校本专科毕业设计(论文)三等奖指导教师
- 2016-01-182014-2015学年“最受学生欢迎的班主任”
其他联系方式
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