血清1型禽腺病毒JS2017株感染性克隆构建及病毒拯救
发布时间：2022-01-29点击次数：
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DOI码：10.16303/j.cnki.1005-4545.2021.12.03
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所属单位：扬州大学
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发表刊物：中国兽医学报
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关键字：血清1型禽腺病毒；感染性克隆；病毒拯救；反向遗传操作系统
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摘要：取本实验室前期分离鉴定的1株非致病性血清1型禽腺病毒（FAdV-1）JS 2017株，在LMH细胞扩大培养后提取病毒全基因组DNA，PCR分别扩增基因组左端1 186 bp和右端1 130 bp序列作为同源臂并克隆进质粒SuperCos-1内，成功构建了质粒pCos-UD。质粒pCos-UD线性化后与病毒全基因组DNA共转化入大肠杆菌BJ5183内，通过同源序列间发生同源重组，将完整病毒基因组DNA插入质粒载体中构建成功感染性克隆pCos-FAdV1。分别针对病毒基因组不同部位设计引物进行PCR检测，同时配合限制性内切酶酶切图谱分析确认感染性克隆中已插入完整的病毒基因组序列。通过AscⅠ酶切，从感染性克隆载体中释放完整FAdV-1基因组DNA片段，利用脂质体转染试剂转染入LMH细胞内，成功拯救出病毒cFAdV-1，病毒生长曲线的测定结果显示拯救病毒与亲本病毒JS2017株具有相似的复制能力。本研究中所构建的FAdV-1感染性克隆为进一步开发以FAdV-1为载体的禽用基因工程疫苗提供反向遗传操作技术平台。
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合写作者：王延龙,郭梦娇,张成成,薄宗义,曹永忠
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第一作者：张小荣
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论文类型：研究报告
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通讯作者：吴艳涛
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论文编号：1005-4545（2021）12-2311-07
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学科门类：农学
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一级学科：兽医学
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文献类型：J
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卷号：41
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期号：12
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页面范围：2311-2317
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是否译文：否
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发表时间：2021-12-15
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张小荣
个人信息
- 正高级
博士生导师
硕士生导师 - 教师拼音名称：Zhang Xiaorong
- 出生日期：1978-09-30
- 电子邮箱：
- 入职时间：2003-07-01
- 所在单位：兽医学院
- 学历：博士研究生毕业
- 办公地点：文汇路校区农牧南楼S203
- 性别：男
- 联系方式：E.mail:zxr@yzu.edu.cn
- 学位：博士
- 职称：正高级
- 在职信息：在岗
- 毕业院校：扬州大学
- 学科：预防兽医学
曾获荣誉：
- 2021-12-31扬州大学“十三五”科技工作先进个人
- 2021-10-222020-2021学年“最受学生欢迎的班主任”
- 2017-06-302016年江苏省普通高等学校本专科毕业设计（论文）三等奖指导教师
- 2016-01-182014-2015学年“最受学生欢迎的班主任”
其他联系方式
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