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传染性支气管炎病毒N蛋白广谱单克隆抗体制备与鉴定

发布时间:2022-01-29点击次数:

  • DOI码:10.16372/j.issn.1004-6364.2021.05.005
  • 所属单位:扬州大学
  • 发表刊物:中国家禽
  • 关键字:传染性支气管炎病毒,N蛋白,单克隆抗体
  • 摘要:为制备能与多种基因型传染性支气管炎病毒(IBV)反应的广谱性单克隆抗体,反应谱能够覆盖当前在国内流行的主要优势基因型毒株。通过RT-PCR克隆了QX型IBV CK/CH/JS/2010/12株N基因,分别插入原核表达载体pET-32a(+)和 pGEX-6P-1构建了重组质粒pET-N和pGEX-N,并在大肠杆菌中进行原核表达,通过亲和纯化获得His-N和GST-N两种重组融合蛋白。用 GST-N融合蛋白免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,以重组蛋白His-N作为检测抗原建立间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞。经过筛选和亚克隆,共获得12株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。Western blot结果显示8株单克隆抗体能与测试的所有基因型IBV发生特异性反应,另外4株可以与793B型4/91株以外的其他毒株发生反应。本研究成功获得了广谱性IBV单克隆抗体,为进一步研究建立通用性IBV抗原检测方法奠定了基础。
  • 合写作者:赵佳,郭梦娇,李敏,张成成,吴艳涛
  • 第一作者:杜旭彬
  • 论文类型:研究报告
  • 通讯作者:张小荣
  • 论文编号:1004-6364(2021)05-27-06
  • 学科门类:农学
  • 一级学科:兽医学
  • 文献类型:J
  • 卷号:43
  • 期号:5
  • 页面范围:27-32
  • 是否译文:否
  • 发表时间:2021-05-15
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张小荣

个人信息

  • 正高级
    博士生导师
    硕士生导师
  • 教师拼音名称:Zhang Xiaorong
  • 出生日期:1978-09-30
  • 电子邮箱:
  • 入职时间:2003-07-01
  • 所在单位:兽医学院
  • 学历:博士研究生毕业
  • 办公地点:文汇路校区农牧南楼S203
  • 性别:
  • 联系方式:E.mail:zxr@yzu.edu.cn
  • 学位:博士
  • 职称:正高级
  • 在职信息:在岗
  • 毕业院校:扬州大学
  • 学科:预防兽医学

曾获荣誉:

  • 2021-12-31扬州大学“十三五”科技工作先进个人
  • 2021-10-222020-2021学年“最受学生欢迎的班主任”
  • 2017-06-302016年江苏省普通高等学校本专科毕业设计(论文)三等奖指导教师
  • 2016-01-182014-2015学年“最受学生欢迎的班主任”

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